- 张曼;芮宝玲;沈弢;梁华;
目的了解静脉吸毒HIV-1感染者Th17和Treg细胞百分比及Th17/Treg比例平衡状态,分析其与疾病进展和单核细胞免疫活化的相关性,探讨Th17/Treg比例失衡在HIV致病机制中的作用。方法选取经静脉吸毒感染HIV-1的患者58例,采集静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测Th17和Treg百分比及Th17/Treg比例。ELISA方法检测血浆中sCD14水平。结果 HIV-1感染者Th17细胞百分比和Th17/Treg比值明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01),Th17百分比和Th17/Treg比值与CD4数量呈正相关(P<0.01,r=0.46;P<0.01,r=0.47),与病毒载量呈负相关(P<0.01,r=-0.65;P<0.01,r=-0.69)。HIV-1感染者血浆sCD14水平显著高于健康对照组组(P<0.01),且Th17百分比和Th17/Treg比值与血浆sCD14水平呈负相关(P<0.01,r=-0.54;P<0.01,r=-0.49)。结论 HIV-1感染吸毒人群中Th17和Treg百分比和Th17/Treg比值均明显失衡,且与病毒载量和单核细胞活化标志sCD14均呈负相关,提示Th17/Treg失衡与HIV感染所致病毒复制和免疫活化密切相关。
2013年05期 v.3 330-334页 [查看摘要][在线阅读][下载 275K] - 李晓波;付瑞;王吉;卫礼;王淑菁;岳秉飞;贺争鸣;
目的对鼠诺如病毒分离株BJ10-2062进行全基因组序列测定,并对测序结果进行亲缘关系等分析。方法参照美国国立生物技术信息中心(The National Center for Biotechnology Information,NCBI)发表的MNV1(AY228235)全基因组序列设计引物,根据测定的结果设计下一步引物,分段扩增测序,最后将所测各段拼接;对分离株的全基因组序列进行分析,与人源、牛源和其他鼠诺如病毒的代表株分别进行核苷酸和氨基酸序列的比较并进行亲缘关系分析。结果鼠诺如病毒分离株BJ10-2062基因组全长7 381bp,G+C含量56.63%,A+U含量43.33%,含3个开放读码框;全基因组序列经NCBI BLAST比对,与美国的CR4(EU004674)分离株同源性最高,为92.7%;与其他鼠诺如病毒分离株的同源性大于88%,而与人源和牛源诺如病毒分离株的同源性均小于50%;ORF1~3编码的蛋白相对分子质量分别为187×103、58×103和22×103,含量最高的氨基酸分别是丙氨酸(Ala)、亮氨酸(Leu)、甘氨酸(Gly)和谷氨酰胺(Gln),BJ10-2062分离株各编码蛋白的氨基酸序列与其他鼠诺如病毒间的同源性明显高于人源和牛源诺如病毒;与原始分离株MNV1相比,BJ10-2062VP1衣壳蛋白第296位由赖氨酸突变为谷氨酸,导致其毒力减弱。基于全基因组核酸序列构建的亲缘关系树表明,BJ10-2062与其他鼠诺如病毒分离株均属于genogroup V,与美国的CR4和NIH-A114株亲缘关系最近,并与美国的其他NIH系列毒株一起形成一个独立的分支。结论对鼠诺如病毒BJ10-2062分离株全基因组的测序分析,为进一步研究鼠诺如病毒特性的分子生物学机制奠定了基础。
2013年05期 v.3 335-342页 [查看摘要][在线阅读][下载 341K] - 张军楠;吴星;石大伟;毛群颖;姚昕;高帆;王一平;徐苗;梁争论;
目的探讨接种疫苗诱导免疫应答的机制,为疫苗的研发和应用提供理论基础。方法运用整合分析(Meta分析),分析自美国生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)的基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中下载的3套疫苗免疫基因芯片表达谱数据,初步筛选出疫苗免疫机体后获得性免疫在转录水平上的关键基因及通路。结果应用Meta分析得到疫苗免疫3套数据集的共同差异基因1 403个,其中表达水平上调基因709个,主要包括人类真核翻译延伸因子(EEF1A1)、白细胞介素18(IL-18)和核糖体蛋白大亚基P2(RPLP2)等,富集出自然杀伤细胞(natural killer,NK)介导的细胞毒作用和B细胞受体信号通路等26条通路;表达水平下调的基因694个,主要包括核糖体蛋白L41(RPL41)、核糖体蛋白L32(RPL32)、核糖体蛋白L34(RPL34)和胞浆多聚A结合蛋白3(PABPC3)等,富集出氧化磷酸化和T细胞受体信号通路等11条通路。结论应用Meta分析方法获得多个疫苗免疫机体后诱导获得性免疫的关键基因及通路,对了解疫苗的免疫机制具有重要意义。
2013年05期 v.3 343-348页 [查看摘要][在线阅读][下载 156K] - 李垚;向宽辉;丁海;彭雅琴;赵澄宇;闫玲;庄辉;李彤;
目的分析慢性乙型肝炎(CHB)抗病毒治疗中影响确证病毒学突破(VBT)的因素。方法对用拉米夫定(LMV)单药治疗(n=103)或LMV+阿德福韦酯(ADV)联合治疗(n=97)的CHB患者,应用罗氏公司COBASAmpliPrep/COBASTaqMan48Analyzer系统定量检测血标本中HBV DNA水平。在治疗过程中,患者血清HBV DNA水平较初始应答后最低点升高≥1lg IU/ml为疑似VBT,并在1个月后再次检测HBV DNA水平仍升高≥1lg IU/ml者为确证VBT。用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。结果 HBV DNA升高≥3lg IU/ml患者的VBT确证率均显著高于HBV DNA升高<3lg IU/ml患者(PLMV=0.011,PLMV+ADV=0.005),与治疗方案无关;但当HBV DNA升高<3lg IU/ml时,VBT确证率与治疗方案有关,LMV单药治疗组的VBT确证率显著高于LMV+ADV联合治疗组(P<0.01)。在LMV单药治疗组,HBV DNA最低值处于检测试剂线性范围内的患者,其VBT确证率显著高于线性范围以外的患者[86.08%(68/79)vs 50.00%(12/24),P<0.01]。结论确证VBT受HBV DNA升高值、治疗方案和HBV DNA检测试剂的线性范围影响;发生疑似VBT,间隔1个月后再次检测血标本HBV DNA水平,以确证VBT很有必要,特别是对于HBV DNA最低值处于检测试剂线性范围之外、HBV DNA升高<3lg IU/ml的患者尤为必要。
2013年05期 v.3 349-352页 [查看摘要][在线阅读][下载 161K] - 宋雪芳;曾滢;方鑫;李彤;李杰;潘红星;朱凤才;梁争论;
目的评价20μg重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)[hepatitis B vaccine(Saccharomyces Cerevisiae),HepB-SC]应用于16岁及以上年龄健康成人的安全性和免疫原性。方法采用三臂试验设计,试验疫苗为深圳康泰生物制品股份有限公司(康泰公司)生产的20μg/支HepB-SC,对照疫苗分别为比利时葛兰素史克公司(GSK)生产的20μg/支和康泰公司生产的10μg/支HepB-SC。本研究共入选研究对象2 179人,采取2∶1配对,按0-1-6月程序,试验组免疫1 092人,20μg和10μg对照组分别免疫541和546人,观察接种后的安全性并检测首针免疫后7个月时的乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)。结果试验疫苗与对照疫苗均具有较好的安全性,随访和不良反应观察中均未见有临床意义的严重不良事件。全程免疫后试验组抗-HBs阳转率与20μg对照组差异无统计学意义(98.22%vs 97.64%,P<0.05),但显著高于10μg对照组(98.22%vs 89.96%,P<0.01);免疫后抗-HBs水平试验组显著高于20μg对照组(1 770.81mIU/ml vs952.13mIU/ml,P<0.01)和10μg对照组(1 770.81mIU/ml vs 496.74mIU/ml,P<0.01)。结论 20μg重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)应用于16岁及以上年龄健康人群具有良好的安全性和免疫原性。
2013年05期 v.3 353-357页 [查看摘要][在线阅读][下载 146K] - 杨式芹;翁育伟;郑奎城;谢剑锋;沈晓娜;黄萌;张炎华;严延生;
目的了解鸡胚法分离甲型H1N1流感病毒的特征,为监测实验室开展常规病毒分离和疫苗制备提供参考。方法收集经核酸检测阳性的甲型H1N1流感病例呼吸道标本接种SPF鸡胚,应用红血球凝集试验判定分离结果并测定病毒滴度,以血凝抑制试验鉴定毒株型别。结果对2009-2012年采集的335例甲型H1N1流感病例标本进行鸡胚病毒分离,平均分离率为87.76%。在鸡胚传代第1代,病毒分离阳性率为6.8%,第2代阳性率为64.29%,第3代则达到96.26%。但病毒在鸡胚中的复制效率不高,血凝滴度普遍较低,73.13%的分离物血凝滴度低于1∶16,48.64%的分离物血凝滴度低于1∶4。结论鸡胚对甲型H1N1流感病毒敏感,可用于病毒分离,持续传代有利于提高病毒分离阳性率,但病毒培养物的血凝滴度普遍较低。
2013年05期 v.3 358-361页 [查看摘要][在线阅读][下载 116K] - 戎霞;许茹;沈爱文;王敏;黄珂;黄杰庭;熊华平;张雪梅;廖峭;林昌周;付涌水;
目的研究广州无偿献血人群中丙型肝炎病毒(HCV)流行情况,了解HCV在广州地区流行趋势,为保障血液安全及制定HCV防控政策提供基础资料。方法选取2009-2011年在广州血液中心无偿献血者中抗-HCV检测双试剂呈反应性的献血员1 407人;收集性别、年龄、学历等人口学特征数据,随机抽取HCV RNA阳性者765例分析HCV亚型信息,对3年的结果进行比较。结果 2009-2011年广州市无偿献血人群的HCV感染率分别为0.17%、0.21%和0.19%。χ2检验显示:2010年的感染率显著高于2009年(χ2=9.774,P=0.008);<20岁年龄组中,2011年HCV阳性率高于2009及2010年(χ2=39.041,P=3.33×10-9);20~29岁年龄组中,2010年及2011年HCV阳性率高于2009年(χ2=12.678,P=0.002);男性HCV阳性率2010年及2011年有所上升(χ2=6.770,P=0.034);2010年及2011年大学/大专学历者中HCV阳性率较2009年有显著提高(χ2=17.736,P=1.408×10-4)。广州地区流行的HCV亚型主要为HCV 1b和HCV 6a,3年间的亚型分布无明显变化(P=0.153)。结论广州地区献血人群的HCV阳性率处于较低水平,但30岁以下、男性、大学/大专文化程度的献血者中HCV阳性率有上升的趋势,需加强对HCV的宣教和防控工作。
2013年05期 v.3 362-366页 [查看摘要][在线阅读][下载 140K] - 裴耀文;王建醒;林艺;丁淑军;王连森;逄博;孙大鹏;王显军;
目的了解2010年山东省来源于手足口病患者和健康人的埃可病毒30型(ECHO30)的基因特征,为制定肠道病毒感染的预防控制策略提供依据。方法采集手足口病患者和健康人群的粪便标本,接种于RD、Hep-2细胞并分离病毒,阳性分离物采用分子生物学方法进行型别鉴定和VP1编码区基因的序列测定,对ECHO30毒株进行同源性分析,与GenBank检索到的其他ECHO30毒株构建基因系统进化树以分析ECHO30的基因特征。结果分别从手足口病患者和健康人的粪便标本中分离得到8株和10株ECHO30,同源性分析显示,两种来源的ECHO30在核苷酸水平上具有较高的同源性(92.7%~98.6%),在进化树上位于同一个分支,与2010年山东省临沂市分离株最近(96.7%~98.7%),与原型株同源性较低(79.6%~81.3%)。结论山东省2010年来源于手足口病患者和健康人的ECHO30亲缘关系较近,具有同一进化来源,健康人携带的ECHO30病毒可能成为手足口病的传染源。
2013年05期 v.3 367-371页 [查看摘要][在线阅读][下载 222K] - 王丽春;潘玥;邵聪文;朱艳菊;周竞贤;张云昆;朱云;马绍辉;
目的分离并鉴定2010年昆明市无菌性脑膜炎的病原埃可病毒12型(ECHO12)病毒株F343/KM/2010,分析其VP1基因遗传特征,为病毒性脑炎的防控提供科学依据。方法采用RD细胞和Hep-2细胞对15份疑似无菌性脑膜炎患者粪便样品进行分离,经微量中和试验对该分离株进行鉴定,通过RTPCR法扩增病毒VP1基因和测序,并采用MEGA5.05等软件进行进化树和同源性分析。结果 9份样品出现细胞病变效应,其中F343/KM/2010分离株经微量中和试验定型为ECHO12病毒;经RT-PCR法扩增获得873bp的VP1基因,与国内外11株ECHO12病毒分离株核苷酸和氨基酸的同源性为81.4%~92.8%和97.6%~99.3%,其中与国内分离株的核苷酸和氨基酸同源性为89.5%~92.8%和98.3%~99.5%。F343/KM/2010株与原型株Travis比较在氨基酸上有8个位点发生突变,而与中国株比较主要在第288位点上发生了突变。在进化树上与国内分离株属于同一个分支,而国外分离株分属其他两个不同的分支。结论 F343/KM/2010分离株为肠道病毒ECHO12病毒,与中国其他分离株同属一个分支。
2013年05期 v.3 372-376页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K] - 卫海燕;穆玉姣;许玉玲;黄学勇;马宏;陈豪敏;许汴利;
目的了解河南省与手足口病相关的埃可病毒1型(echovirus 1,E1)河南分离株2140/Henan/2010的基因组特征,对其进行全基因测序,并与其他肠道病毒基因进行同源性比较和进化分析。方法采用RT-PCR扩增全基因,采用SeqMan将所测的全部序列进行拼接,使用MegAlign进行同源性比较,MEGA4进行进化分析。结果 2140/Henan/2010基因组全长7 325bp。与原型株Farouk比较,编码区氨基酸同源性为97.6%,核苷酸同源性为80.7%,其中P1核苷酸差异为21.2%,VP1核苷酸差异为16.5%,P2、P3核苷酸差异分别为19.9%、22.4%。进化分析发现,2140/Henan/2010和E1/Farouk仅在P1区和VP1区形成同一分枝,2140/Henan/2010和E1/Farouk在P1和VP1区、P2区、P3区分别与E4、E30、E12亲缘关系最相近。结论与原型株相比,2140/Henan/2010株编码区氨基酸序列差异很小,核苷酸变异较大,核苷酸变异多为无义突变,不影响氨基酸序列的变化;推测E1在P1以外的多个基因组区段分别与其他血清型肠道病毒发生重组。
2013年05期 v.3 377-381页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K] - 艾书玲;何清;唐奇远;敖飞健;廖雪姣;吕德良;赵连三;
目的阐明慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染自然病程中免疫清除期不同阶段血清学及肝脏病理的演变规律。方法将处于免疫清除期的慢性乙型肝炎(CHB)患者,按照其肝组织纤维化分期由轻到重(S0、S1、S2、S3~S4)将免疫清除期划分为初、早、中、后4个阶段,统计不同阶段患者年龄、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBV DNA定量、肝组织炎症分级及肝组织乙型肝炎核心抗原(HBcAg)分布的关系。结果符合免疫清除期纳入标准患者248例,男性187例,女性61例,平均年龄(31.7±7.5)岁。处于初、早、中、后4个阶段的患者分别为15例、141例、54例、38例,相应年龄分别为(27.40±4.87)岁、(30.74±6.12)岁、(32.85±9.40)岁、(35.45±8.38)岁,ALT分别为(64.73±38.81)U/L、(103.06±82.54)U/L、(165.83±263.73)U/L、(146.34±168.23)U/L,血清HBV DNA载量分别为(7.36±1.30)lg IU/ml、(7.26±0.92)lg IU/ml、(6.92±1.08)lg IU/ml、(6.47±1.10)lg IU/ml。不同阶段患者年龄、ALT、HBV DNA载量、肝组织炎症分级及HBcAg分布差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论免疫清除期是肝组织炎症逐渐活跃,HBV DNA载量持续下降的演变过程。随着不同阶段的进展,肝组织HBcAg分布进展到以浆型为主。
2013年05期 v.3 382-386页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K] - 朱玉侠;高正军;苏红领;雷渭荣;贾桂;朱疆依;韩英;
目的观察替比夫定(LdT)治疗乙型肝炎(乙肝)肝硬化患者的疗效。方法采用随机开放对照研究方法,将100例乙肝肝硬化患者随机分成两组,LdT组50例,拉米夫定(LAM)组50例,疗程均为48周。观察患者的病毒学、生化学、血清学及肝脏合成功能指标、Child评分及部分组织学变化情况。结果乙肝肝硬化患者经LdT治疗24周及48周后,HBV DNA水平由基线的(6.62±1.67)lg拷贝/ml分别降至(3.27±1.33)、(3.17±1.45)lg拷贝/ml,24周、48周HBV DNA阴转率为48.00%(24/50)和54.00%(27/50),与LAM组差异无统计学意义(χ2=0.005,P=0.945);LdT组初始HBeAg阳性患者29例,治疗结束时HBeAg阴转率为37.93%(11/29),转换率为20.69%(6/29),与LAM组差异无统计学意义(χ2=0.042,P=0.838);LdT组治疗结束时丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平由基线的(103.17±38.20)IU/L降至(45.38±7.03)IU/L(t=6.302,P<0.05),Child评分及失代偿期组中反映肝脏合成指标的白蛋白及胆碱酯酶也均较治疗前基线水平有不同程度的改善(P<0.05);LAM组有2人死亡,LdT组1人死亡,均死于肝硬化相关并发症,两组不良反应的发生率差异无统计学意义(χ2=1.895,P=0.169);LAM治疗组有4例、LdT治疗组有2例于治疗中出现病毒学突破,检测出现YMDD变异,给予加用阿德福韦酯10mg,每日1次治疗,两组间病毒耐药率差异无统计学意义。肝脏组织学检查可见LdT治疗前后肝脏炎症及纤维化程度的改善。结论 LdT具有快速强效抑制病毒、不良反应少等特点,并能改善乙肝肝硬化患者肝组织炎症及纤维化程度,对于HBV活跃复制的肝硬化患者有积极治疗作用。
2013年05期 v.3 387-391页 [查看摘要][在线阅读][下载 227K]